一、储备标准溶液配置
1、打开分析天平的电源;
2、拖拽称量纸至分析天平,将称量纸放在分析天平上;
3、点击归零按键,天平读数为“0.0000”;
4、使用药匙取对羟基苯甲酸甲酯,放入分析天平中的称量纸上;
5、在重量输入框中输入“1”,回车,用分析天平准确称量1.0000g。
6、拖拽称好的药品至至一个干净的烧杯中,将药品倒入烧杯中;
7、拖拽甲醇至装有药品的烧杯,在烧杯中加入约10ml甲醇,用玻璃棒搅拌至固体药品全部溶解。
8、拖拽烧杯至1#容量瓶(100ml),将溶解好的溶液用玻璃棒引流,转移至1#容量瓶中;
9、拖拽甲醇至烧杯,沿着烧杯壁向烧杯中倒入少量甲醇,用甲醇润洗烧杯;
10、拖拽烧杯至1#容量瓶,将润洗烧杯的甲醇溶液用玻璃棒引流,转移至1#容量瓶中;
11、重复润洗三次
12、拖拽甲醇至容量瓶,用玻璃杯引流向容量瓶中加入甲醇溶液至刻度线以下;
13、拖拽甲醇至一个干净的空烧杯,向其中加入少量甲醇(约15ml);
14、拖拽滴管至盛有甲醇的烧杯,用滴管取甲醇溶剂
15、拖拽取好甲醇溶剂的滴管至容量瓶,向容量瓶中滴加甲醇溶液至容量瓶中液位凹面平行于刻度线,滴管回到盛有甲醇的烧杯
16、点击1#容量瓶,用手按住容量瓶塞翻转容量瓶3次,将1#中溶液摇匀备用。
二、标准使用液配置
17、拖拽1#容量瓶至1#烧杯,向烧杯中加入少量甲酯标准储备溶液(约5ml)
18、在移液枪架上,取下200μL移液枪;
19、点击移液枪取液按钮,旋转取液按钮,将量程更改为100μL;
20、拖拽移液枪至移液枪头盒,(自动)打开枪头盒盖,移液枪下端套上枪头
21、拖拽移液枪至1#烧杯,吸取对羟基苯甲酸甲酯的甲醇标准储备液100μL,
22、拖拽移液枪至废液瓶,吸取的标准储备也放入废液瓶中,润洗一次。
23、拖拽至1#烧杯,用移液枪吸取对羟基苯甲酸甲酯的甲醇标准储备液100μL;
24、拖拽移液枪至5#容量瓶(10mL),将标准储备液移入10mL容量瓶中。
25、点击枪头,取下枪头丢入固废桶中,移液枪放回移液枪架。
26、拖拽甲醇至5#容量瓶,用玻璃杯引流,加入甲醇至刻度线下方
27、点击装有甲醇的烧杯中的滴管,用滴管吸取甲醇
28、拖拽滴管至5#容量瓶,向容量瓶中滴加甲醇溶剂至容量瓶中液位凹面平行于刻度线,滴管回到盛有甲醇的烧杯
29、点击5#容量瓶,用手按住容量瓶塞翻转容量瓶3次,将5#中溶液摇匀备用。
30、拖拽移液枪至移液枪头盒,(自动)打开枪头盒盖,移液枪下端套上枪头
31、拖拽移液枪至1#烧杯,吸取对羟基苯甲酸甲酯的甲醇标准储备液100μL,
32、拖拽移液枪至废液瓶,吸取的标准储备也放入废液瓶中,润洗一次。
33、拖拽至1#烧杯,用移液枪吸取对羟基苯甲酸甲酯的甲醇标准储备液100μL;
34、拖拽移液枪至9#容量瓶(10mL),将标准储备液移入9#容量瓶中。
35、点击枪头,取下枪头丢入固废桶中
36、拖拽甲醇至9#容量瓶,用玻璃杯引流,加入甲醇至刻度线下方
37、点击装有甲醇的烧杯中的滴管,用滴管吸取甲醇
38、拖拽滴管至9#容量瓶,向容量瓶中滴加甲醇溶剂至容量瓶中液位凹面平行于刻度线,滴管回到盛有甲醇的烧杯
39、点击9#容量瓶,用手按住容量瓶塞翻转容量瓶3次,将9#中溶液摇匀备用,配置的为标准混合使用液
40、点超声脱气机电源按键,打开设备电源
41、依次拖拽5种标准使用液至超声脱气机中脱气15min后;
42、拖拽5#容量瓶至5#烧杯,将配置好的标准使用液倒入烧杯中
43、拖拽一干净的注射器至5#烧杯,将烧杯中标准使用液吸入到注射器中
44、点击注射器针头,取下针头,丢弃至固废桶中
45、拖拽0.45μm针孔式过滤器至吸有标准使用液的注射器,将针孔式过滤器装作注射口上
46、拖拽注射器至10#烧杯,使用注射器通过0.45μm针孔式过滤器分别过滤标准使用液至10#烧杯,将注射器丢入固废桶中
三、待测样品准备
47、拖拽待测至15#烧杯,将待测溶液倒入到15#烧杯中
48、拖拽一干净的注射器至15#烧杯,将烧杯中待测溶液吸入到注射器中
49、点击注射器针头,取下针头,丢弃至固废桶中
50、拖拽0.45μm针孔式过滤器至吸有待测溶液的注射器,将针孔式过滤器装作注射口上
51、拖拽注射器至16#烧杯,使用注射器通过0.45μm针孔式过滤器分别过滤标准使用液至15#烧杯,将注射器丢入固废桶中
四、更换流动相
52、拖拽甲醇至1L的量筒,用量筒量取500ml左右甲醇
53、拖拽另一个1L的量筒至超纯水制水机,用量筒去超纯水1L左右;
54、拖拽两个流动相瓶至制样试验台,将流动相瓶放置在试验台上
55、拖拽盛有甲醇的量筒至较小的流动相瓶,将甲醇倒入流动相瓶
56、拖拽盛有水的量筒至较大的流动相瓶,将水倒入流动相瓶
57、拖拽两个流动相瓶至超声脱气机,放入超声脱气机中脱气15min后备用。
五、测样
58、点击A高压泵电源按键,打开A高压泵
59、点击B高压泵电源按键,打开B高压泵
60、点击检测器电源按键,打开检测器
61、点击柱温箱电源按键,打开柱温箱电源开关,置于“|”状态。
62、点击电脑主机电源按键,打开电脑电源
63、点击显示屏,页面切换为显示屏页面
64、双击桌面软件“伍丰液相”,打开测试操作软件
65、点击A高压泵前盖,打开高压泵前盖放置在桌面上
66、点击高压泵的排空阀,将高压泵的排空阀逆时针旋转半圈;
67、点击B高压泵前盖,打开高压泵前盖放置在桌面上
68、点击高压泵的排空阀,将高压泵的排空阀逆时针旋转半圈;
69、点击显示屏,打开测试软件操作界面
70、在电脑上的伍丰工作站参数设置区域内,A泵流量设置输入栏中输入“100”,回车,设置A泵流量为100%
71、在流速设置输入栏中输入“5”,回车,设置流速为5mL/min
72、点击“设置”,确认参数设置
73、点击“泵启动”,用流动相冲洗系统5min左右。
74、点击A高压泵排空阀,排空阀顺时针旋转半圈(复位)
75、点击B高压泵排空阀,排空阀顺时针旋转半圈(复位)
76、点击A高压泵前盖,盖上前盖;
77、点击B高压泵前盖,盖上前盖;
78、点击显示屏,打开测试软件操作界面
79、在右侧紫外检测器设置中,波长设置输入栏中输入“254”回车,设置波长为254nm
80、点击“设置”,确定波长设置
81、参数设置区域内,A泵流量设置输入栏中输入“60”,回车,设置A泵流量为60%
82、在流速设置输入栏中输入“1”,回车,设置流速为1mL/min
83、点“设置”按钮,确定设置
84、点击“泵启动”,开始测定仪器基线。
85、实时采样的图谱区域出现谱线,为仪器基线,待仪器基线平稳后,即可开始进样
86、拖拽微量注射(5μL)器至10#烧杯,用注射器吸取溶液
87、拖拽吸有溶液的微量注射器至废液瓶,将注射器中溶液排入废液瓶中,润洗注射器
88、拖拽润洗好的微量注射器至10#烧杯,吸取溶液
89、点击注射器,注射器活塞略向内推动,推排注射器中的空气泡
90、点击微量注射器,注射器放大,注射器刻度凹面与眼平行,可以观察到注射器活塞推动至4μL刻度,定容至4μL。
91、拖拽微量注射器至液相色谱仪,确认进样口扳手在“LOAD”位置,将注射器插入进样口并推动活塞将样品打入进样口
92、点击进样口扳手,将其下扳至“INJECT”位置后,仪器开始自动运行测试样品。
93、单击工具条上参数设置按钮,进入数据采集参数设置对话框
94、输入实验名称,回车并确认保存路径。
95、点击“确定”,完成设置。
六、数据分析处理
96、双击桌面测试文件(生成的测试结果),打开测试结果图谱,进行数据处理;